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植物组织培养技术

  1. 用于组织培养的植物组织的制备是在无菌条件下,由层流柜提供的HEPA过滤空气中进行的。
  2. 将组织在无菌容器中培养,例如培养皿中的陪替氏培养皿或烧瓶中,其温度和光强度均受控。
  3. 来自环境的活植物材料在其表面(有时是内部)上自然受到了微生物的污染,因此在获取合适的样品(称为外植体)之前,应先用化学溶液(通常是酒精,次氯酸钠或次氯酸钙)对它们的表面进行灭菌处理。
  4. 然后通常将无菌外植体置于无菌固体培养基的表面上,但有时直接置于无菌液体培养基中,特别是在需要细胞悬浮培养时。
  5. 固体和液体介质通常由无机盐加上一些有机营养素,维生素和植物激素组成。固体培养基是从液体培养基中加入胶凝剂(通常是纯化的琼脂)制成的。
  6. 培养基的成分,特别是植物激素和氮源(硝酸盐对铵盐或氨基酸)对从初始外植体生长的组织的形态具有深远的影响。
  7. 例如,过量的生长素通常会导致根部增殖,而过量的细胞分裂素可能会产生芽。
  8. 生长素和细胞分裂素的平衡通常会产生无组织的细胞或愈伤组织生长,但是生长的形态将取决于植物种类以及培养基组成。
  9. 随着培养物的生长,通常将切片切成薄片,然后将其继代培养到新的培养基上,以使其生长或改变培养物的形态。组织培养者的技能和经验对于判断培养的碎片和丢弃的碎片很重要。
  10. 当芽从培养物中出来时,可以将它们切成薄片并与生长素生根,以产生小植株,当小植株成熟时,可以将其转移到盆栽土壤中,以作为普通植物在温室中进一步生长。

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